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賴氨酸發(fā)酵用賴氨酸發(fā)酵消泡劑

發(fā)布時(shí)間:2012-9-4 15:15
提取法 一般自乳酪素或血粉中提取,以血粉為多。經(jīng)鹽酸或硫酸水解、濃縮等工序后,在PH1.8-2.0時(shí)以強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂吸附、氨水洗脫;或苦味酸沉淀等方法獲得賴氨酸結(jié)晶。 合成法 化學(xué)法合成ɑ-賴氨酸的工藝很多,用于工業(yè)化的生產(chǎn)方法有荷蘭DSM法和日本東麗法兩種。DSM法是以己內(nèi)酰胺為原料,東麗法以環(huán)己烷(環(huán)己烷光化硝化過(guò)程的副產(chǎn)物)為原料。兩者都是首先生成ɑ-氨基己內(nèi)酰胺,再經(jīng)水解生成dl-賴氨酸,以后再用酶法進(jìn)行分割,制成L-賴氨酸。 發(fā)酵法 包括直接賴氨酸發(fā)酵消泡劑發(fā)酵法和發(fā)酵消泡劑賴氨酸兩步發(fā)酵法。所謂兩步發(fā)酵法即由甲菌生成二氨基庚二酸,已菌生成二氨基庚二酸脫羧酶,從而生成賴氨酸。 酶法合成 酶法轉(zhuǎn)化:氨基酸制造工業(yè)在1970年以后確立了賴氨酸發(fā)酵消泡劑發(fā)酵法及合成法為主的生產(chǎn)工藝。近年來(lái)化學(xué)合成法和酶合成法相結(jié)合的新工藝用于生產(chǎn)L-氨基酸有了新的成就。顯示酶法收率高,成本低,周期短的優(yōu)點(diǎn)。酶法轉(zhuǎn)化dl-氨基己內(nèi)酰胺為L(zhǎng)-賴氨酸,則于1977年10月在日本正式投入生產(chǎn)。 酶法轉(zhuǎn)化原理:利用隱球酵母產(chǎn)生的L-氨基己內(nèi)酰胺水解酶將L-氨基己內(nèi)酰胺水解,生產(chǎn)L-賴氨酸。這種酶只能水解L型的,而對(duì)D型則無(wú)能為力。D-氨基己內(nèi)酰胺需要通過(guò)無(wú)色桿菌產(chǎn)生的D-氨基己內(nèi)酰胺消旋酶將其旋化,生產(chǎn)L-氨基己內(nèi)酰胺。如將以上兩種菌混合培養(yǎng),同時(shí)使用賴氨酸發(fā)酵消泡劑,則可使dl-氨基己內(nèi)酰胺直接轉(zhuǎn)化,全部生成L-賴氨酸。 酶法分割:即將dl-賴氨酸通過(guò)?;傅淖饔茫咕哂猩锘钚缘腖-賴氨酸分出。?;钢荒茏饔糜谝阴?L-賴氨酸,而對(duì)乙酰-D-賴氨酸不起反應(yīng),經(jīng)酶與賴氨酸發(fā)酵消泡劑作用后,得到L-賴氨酸和乙酰-D-賴氨酸,再用有機(jī)溶劑提取L-賴氨酸。關(guān)于dl-賴氨酸的分割,除酶法外,還有化學(xué)法分割,如賴氨酸谷氨酸鹽法分割、dl-賴氨酸-3,5-二硝基苯甲鹽法分割和有機(jī)溶劑分割等。 賴氨酸的生物合成途徑 微生物生物合成賴氨酸有兩條途徑:一是細(xì)菌類的二氨基庚二酸(DAP)途徑;另一條是霉菌酵母ɑ-氨基己二酸途徑。具有其中一條途徑的菌種就不具有另一條途徑的酶系。二氨基庚二酸(DAP)途徑:除細(xì)菌外,也存在于綠藻,原生動(dòng)物和高等植物之中。這條途徑與合成蘇氨酸、蛋氨酸和異亮氨酸途徑一樣都以天門(mén)冬氨酸作為起始物質(zhì)。而天門(mén)冬氨酸是由延胡索酸直接氨化生成。ɑ-氨酸己二酸途徑:這是一條循環(huán)系統(tǒng)。 二氨基庚二酸途徑的代謝調(diào)節(jié) 這條途徑廣泛存在于細(xì)菌之中,但其代謝控制卻是多種多樣的,即使是近緣菌株之間也不一樣。 對(duì)于酸棒桿菌(還有多粘芽孢桿菌、莢膜紅假單胞菌、黃色短桿菌)不存在像大腸桿菌的同功酶,而僅僅一種由賴氨酸+蘇氨酸的協(xié)同抑制進(jìn)行代謝控制。在大腸桿菌中天門(mén)冬氨酸半醛脫氫酶還受到賴氨酸的抑制,而谷氨酸棒桿菌與賴氨酸發(fā)酵消泡劑等不受抑制。至少高絲氨酸脫氫酶,在大腸桿菌中,亦有兩個(gè)同功酶,HD-1受蘇氨酸的抑制和阻礙。HD-2受蛋氨酸的阻礙。而在谷氨酸棒桿菌只有以后各酶,受蛋氨酸阻礙和蘇氨酸抑制。大腸桿菌中還有別的酶受阻礙和抑制。這些抑制和阻礙的差別,對(duì)選育賴氨酸生產(chǎn)菌株關(guān)系極大。 本文參考《發(fā)酵微生物學(xué)》一書(shū)。
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