培養(yǎng)基的滅菌及影響因素
發(fā)布時(shí)間：2012-5-9 13:14
滅菌方式
分批滅菌：適于規(guī)模小的工廠和種子罐。是指培養(yǎng)基在發(fā)酵罐中用蒸氣加熱，達(dá)到預(yù)定溫度且維持一定時(shí)間后，從夾套或蛇管通冷卻水，迅速將培養(yǎng)基冷卻，并通入無菌空氣保壓，至接近發(fā)酵溫度，然后接種。這種方法不需其它設(shè)備，操作簡(jiǎn)易，其缺點(diǎn)是加熱和冷卻所需時(shí)間較長(zhǎng)；相對(duì)地說是延長(zhǎng)發(fā)酵周期，使發(fā)酵罐的利用率降低。所以，大型發(fā)酵罐采用這種方法，不甚合理，尤其發(fā)酵罐本身的 夾套或蛇管傳熱面積有限，做不到高溫度短時(shí)間的原則。
連續(xù)滅菌：適于大規(guī)模工廠，將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷進(jìn)行加熱，維持和冷卻，最后進(jìn)入發(fā)酵罐。它有很多優(yōu)點(diǎn)如：
①可以采用高溫短時(shí)間滅菌，物料、受熱時(shí)間短，減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞，有利于提高生產(chǎn)效率。
②總的滅菌時(shí)間較分批滅菌大為減少，縮短發(fā)酵罐的生產(chǎn)周期。
③蒸氣負(fù)荷均衡，提高鍋爐效率。
④適應(yīng)自動(dòng)控制。
連續(xù)滅菌的缺點(diǎn)是容易產(chǎn)生泡沫，粘度大或顆粒物料的培養(yǎng)基會(huì)造成局部滅菌不充分與管道堵塞現(xiàn)象。
影響培養(yǎng)基滅菌的幾個(gè)因素①培養(yǎng)基中污染菌的數(shù)量與滅菌時(shí)間的關(guān)系。
②培養(yǎng)基pH的影響：在pH 6.0～8.0時(shí)，微生物最耐熱，不易死亡，pH<6.0時(shí)，氫離子易滲入微生物細(xì)胞內(nèi)，改變細(xì)胞的生理狀態(tài)，促使其死亡，所以培養(yǎng)基的pH越低，所需的滅菌時(shí)間也越短。
③培養(yǎng)基成分的影響：培養(yǎng)基中所含一定濃度的糖類、油脂及蛋白質(zhì)，會(huì)增加微生物的耐熱性。高濃度的有機(jī)物增加培養(yǎng)基的粘度，影響熱的傳入，應(yīng)提高滅菌溫度。而高濃度的鹽類增加滲透壓，可以促進(jìn)熱的傳導(dǎo)，降低微生物的耐熱性，故易于滅菌。
④培養(yǎng)基中顆粒的影響：特別是顆粒大和結(jié)塊的傳熱效果差，滅菌就較困難，所以滅菌前必須充分?jǐn)嚢?。有時(shí)需提高滅菌溫度，延長(zhǎng)滅菌時(shí)間來達(dá)到滅菌的要求。
⑤泡沫的問題：培養(yǎng)基在滅菌時(shí)產(chǎn)生泡沫對(duì)對(duì)滅菌效果有很大的影響，因?yàn)榕菽械目諝庑纬筛魺釋樱諝獾膶?dǎo)熱差，包裹在泡沫中的微生物就不容易被殺死（達(dá)不到受熱溫度）。因此，滅菌操作中要注意泡沫的產(chǎn)生，如果不要時(shí)，可以再發(fā)酵的過程添加發(fā)酵消泡劑，起到消泡的作用，還要防止壓力驟降而起泡。
本文參考《發(fā)酵微生物學(xué)》一書。
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