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酶制劑消泡劑與酶制劑培養(yǎng)方法

發(fā)布時間:2013-1-7 14:04
載體培養(yǎng) 脫胎于曲法培養(yǎng),同時又吸收了液體培養(yǎng)的優(yōu)點,是近年來新發(fā)展的一種培養(yǎng)方法,其特征是以天然或人工合成的多孔材料代替麩皮之類的固態(tài)基質(zhì)作為微生物生長的載體,營養(yǎng)成分可以嚴格控制,酶制劑消泡劑發(fā)酵結(jié)束,只須將菌體和培養(yǎng)液擠壓出來進行抽提,載體又可以重新使用。據(jù)報道,利用載體培養(yǎng)法培養(yǎng)霉菌、酵母、擔(dān)子菌、細菌、放線菌可以提取多種產(chǎn)物,如色素、肌苷酸、酶等。 載體的材料必須經(jīng)得起蒸氣加熱或藥物滅菌,多孔結(jié)構(gòu)既有足夠的表面積,又能允許酶制劑消泡劑與空氣流通。對于其幾何形狀無特殊要求,形體大小應(yīng)有適當(dāng)范圍。載體種類,目前以脲烷泡沫塑料塊用得較多,石棉已很少采用。以泡沫塑料塊為例,每顆+立方體平均重量1.5 g,邊長5-20 mm,吸水率(指載體體積與吸收的培養(yǎng)基體積之比(%)]應(yīng)保持較大的變化范圍(30%-90%),便于靈活掌握。 兩步法液體深層培養(yǎng) 微生物生長與酶制劑消泡劑產(chǎn)酶的最適條件往往有很大差異。例如,往培養(yǎng)基中添加葡萄糖與酶制劑消泡劑能大大增加菌絲的生長,消除生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的泡沫,然而卻嚴重阻礙許多酶的合成。加強培養(yǎng)液的通氣雖然能促進微生物的生長,可是在多數(shù)場合下反而抑制酶的合成。為了取得更大量的活性酶,必須制訂一種調(diào)節(jié)方法,既要求細胞的單位酶活性高,又要求細胞的數(shù)量多。也就是說,給予菌種在各個生理時期創(chuàng)造不同的條件。兩步法液體深層培養(yǎng)就是實現(xiàn)這種調(diào)節(jié)方法的具體措施這一,已經(jīng)在葡萄糖異構(gòu)酶、ɑ-甘露苷酶的微生物合成方面收到成效。 兩步法的特點是將菌體生長條件與酶制劑消泡劑產(chǎn)酶條件區(qū)分開來,因而更容易控制各個生理時期的最適條件。 提高微生物酶活性和產(chǎn)率的途徑是多方面的,其中控制營養(yǎng)和培養(yǎng)條件是最基本也是最重要的途徑。改變培養(yǎng)基成分,常常能提高酶活性;改變培養(yǎng)基的氫離子濃度、酶制劑消泡劑和通氣等條件,可以調(diào)節(jié)酶系的比例;改變代謝調(diào)節(jié)或遺傳型,可以使酶的微生物合成產(chǎn)生成千倍的變化。 上述的這些措施,對于微生物產(chǎn)酶的影響并非孤立的,而是相互聯(lián)系、相互制約的。所謂最佳培養(yǎng)條件與培養(yǎng)基的最佳組成,都是保證酶合成達到最高產(chǎn)率的控制條件。通常,菌種的生長與產(chǎn)酶未必是同步的,產(chǎn)酶量也并不是完全與微生物生長旺盛程度成正比。 為了使菌體最大限度地產(chǎn)酶,除了根據(jù)菌種特性或生產(chǎn)條件選擇恰當(dāng)?shù)漠a(chǎn)酶培養(yǎng)基外,還應(yīng)當(dāng)為菌種在各個生理時期創(chuàng)造不同的培養(yǎng)條件,使用酶制劑消泡劑消除生產(chǎn)過程中的泡沫。例如,細菌淀粉酶生產(chǎn)采取“低濃度發(fā)酵,高濃度補料”,蛋白酶生產(chǎn)采取“提高前期培養(yǎng)溫度”等不同措施,提高了產(chǎn)酶水平。 本文參考《發(fā)酵工程原理與技術(shù)》一書。
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